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植物花色苷含量檢測(cè)
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-05-24 | 250 次瀏覽 | 分享到:

花色苷是花色素和糖以糖苷鍵的方式結(jié)合而成的一種化合物,它存在于植物的花、莖、葉、果實(shí)和根部的細(xì)胞液中。有了花色苷的存在,能夠讓植物呈現(xiàn)不同的顏色,比如紅色、紫色、紫紅色或蘭色等?;ㄉ帐且环N類黃酮,能夠清除自由基,保護(hù)視力,已被應(yīng)用于食品、保健品、化妝品、醫(yī)藥等行業(yè)?;ㄇ嗨匾彩且环N花色苷,只是它不含有糖基,它是一種水溶性的色素,可以隨著細(xì)胞酸堿度而發(fā)生顏色的變化。



檢測(cè)植物組織中的花色苷含量,一般可以用到pH示差法、高效液相色譜(HPLC)法和質(zhì)譜(MS)法。


1.pH示差法


用這種方法檢測(cè)花色苷含量,就先準(zhǔn)備緩沖液,第一、pH1.0的緩沖液,1.86g的氯化鉀,加980mL的蒸餾水,用鹽酸調(diào)節(jié)pH到1.0,定容1000mL。第二、pH4.5緩沖液,用32.81g的無水醋酸鈉,加980mL的蒸餾水,用鹽酸調(diào)pH值到4.5,定容至1000mL。



下面就要進(jìn)行檢測(cè)了,用pH1.0,pH4.5的緩沖液,將樣品中的花色苷稀釋一定的倍數(shù),平衡15min。然后,分別讓這2個(gè)不同的pH的溶液,在可見分光光度計(jì)的510nm和700nm的波長(zhǎng)處,測(cè)定吸光度,以蒸餾水為空白對(duì)照。測(cè)定的吸光度A=(A510-A700)pH1.0-(A510-A700)pH4.5,花色苷的濃度就是檢測(cè)的吸光度Ax稀釋倍數(shù)x矢車菊-3-葡萄糖苷的分子量x消光系數(shù)。


2.液相色譜質(zhì)譜(LC-MS)法


樣品處理:將待測(cè)的花色苷樣品進(jìn)行處理,粉碎成粉末后,加入適量的甲醇或乙醇進(jìn)行提取,在離心機(jī)上分離,并收集上清液備用。

LC-MS檢測(cè):將上清液進(jìn)樣到HPLC進(jìn)行分離,以梯度洗脫的方法。通過分離后的花色苷,在質(zhì)譜檢測(cè)器中,獲得分子量和結(jié)構(gòu),可以更準(zhǔn)確、更靈敏的檢測(cè)出花色苷的含量。這種方法,需要昂貴的檢測(cè)設(shè)備和成熟的技術(shù)人員,才能有效的完成檢測(cè)。


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