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大蒜素是從植物大蒜的蒜頭中提取的一種含有機硫的化合物,在洋蔥或其他蔥中都能發(fā)現(xiàn),具有強烈的蒜臭氣味,味道辣。大蒜素不溶于甘油、丙二醇等,但可以和乙醇、氯仿、苯醌等混合。具有較強的抗菌作用,但對熱和堿不穩(wěn)定,當遇到熱或堿的條件下,就失去抗菌能力了,不過對酸還是挺穩(wěn)定的。一般情況下,大蒜素對大腸桿菌、霉菌、病毒等有明顯的抑制作用,在食品、醫(yī)藥和飼料等行業(yè)都會用到它。
檢測樣品中大蒜素的含量,一般采用氣相色譜(GC)法、高效液相色譜(HPLC)法、質(zhì)譜(MS)法、分光光度法等。這里簡單的介紹一下,具體操作可以參考相關(guān)的標準,也可以咨詢有經(jīng)驗的老師。
1.氣相色譜(GC)法
使用GC檢測大蒜素,為了獲得更準確的檢測數(shù)據(jù),一般情況下會和質(zhì)譜聯(lián)用起來。GC-MS檢測有一個主要的優(yōu)點,就是能夠減少可能出現(xiàn)的大蒜素易腐蝕和易揮發(fā)的問題,可以更準確的測出樣品中的大蒜素含量。檢測的主要步驟包括:制備大蒜素樣品-對樣品進行提取-采用GC-MS檢測-獲取數(shù)據(jù)并分析。在檢測的過程中,需要有持續(xù)的氣體供應(yīng)。由于大蒜素在高溫的條件下會被分解破壞,柱溫不要太高,適宜的溫度為70℃。
2.高效液相色譜(HPLC)法
HPLC檢測樣品中的大蒜素,克服了GC-MS檢測的過程色譜柱溫度高、不穩(wěn)定的情況。在HPLC的檢測過程中,可以在較低的柱溫下進行,測定的過程中采用反相色譜柱。大致步驟包括:制備大蒜素標準品溶液-上機測定標準品-標準曲線制作-樣品制備并檢測-讀取數(shù)據(jù)-計算含量-分析結(jié)果。
3.分光光度法
在一定的溫度下,大蒜素能夠在酶的作用下水解產(chǎn)生丙酮酸??梢酝ㄟ^測定產(chǎn)生丙酮酸的方法,計算出樣品中含有大蒜素的含量。丙酮酸怎么檢測呢?因為丙酮酸可以和2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯肼沉淀。利用分光光度計測定有色產(chǎn)物,通過對標準品進行檢測,制作出相關(guān)的標準曲線及回歸方程,并對樣品在同樣的條件下檢測,根據(jù)標準曲線計算出樣品中大蒜素的含量。