中文字幕在线观看第一页-日本伦理午夜福利-亚洲欧美人成视频-秘密影院久久综合亚洲综合-亚洲欧美日韩综合精品视频-亚洲成人av电影在线-国产综合日韩伦理

植物細(xì)胞色素C氧化酶，也稱為細(xì)胞色素氧化酶（COX）。它是細(xì)胞內(nèi)電子傳遞鏈末端的酶，具有質(zhì)子泵的作用，可以將H+由基質(zhì)提到膜間隙，同時(shí)可通過(guò)血紅素中鐵原子的氧化還原變化，將電子傳遞給分子態(tài)氧，最終形成水，并釋放出很多的能量。細(xì)胞色素C氧化酶是由兩個(gè)部分組成的，一部分是多肽鏈，其中包含13個(gè)蛋白質(zhì)。另外一部分是輔助因子，包括細(xì)胞色素C、細(xì)胞色素c氧化酶輔助蛋白、輔助因子I和輔助因子II。在細(xì)胞呼吸鏈中，細(xì)胞色素氧化酶起著重要的作用。

檢測(cè)細(xì)胞色素C氧化酶，這里推薦的是雙抗體夾心法。用純化的植物COX捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入COX，再和HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物。經(jīng)過(guò)洗滌后加入底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化作用下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，最后加入酸轉(zhuǎn)化為黃色。顏色的深淺和樣品中的COX呈正相關(guān)，在酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以計(jì)算出樣品中的COX含量。

為了快速的檢測(cè)，一般用elisa試劑盒的形式。試劑盒組成：說(shuō)明書，封板摸，密封袋，酶標(biāo)包被板，標(biāo)準(zhǔn)品，酶標(biāo)試劑，樣品稀釋液，顯色劑A，顯色劑B，終止液，濃縮洗滌液等。

操作步驟：標(biāo)準(zhǔn)品、樣品加樣-加酶-溫浴37℃,60min-配液-洗滌-顯色-終止-測(cè)定。整個(gè)過(guò)程要按照說(shuō)明書的順序進(jìn)行，先看看注意事項(xiàng)，避免錯(cuò)誤操作或忽略問(wèn)題而導(dǎo)致偏差。

以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣品的OD值，可以計(jì)算出樣品中含有COX的含量。這個(gè)含量還不是真實(shí)的含量，還要乘以稀釋倍數(shù)，才能還原為最初的濃度。