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黃芪甲苷含量測(cè)定方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-06-21 | 505 次瀏覽 | 分享到:

黃芪甲苷是一種有機(jī)物,從中藥材黃芪中提取出來的。黃芪里面的活性物質(zhì)有多種,比如黃芪多糖、黃芪皂苷、黃芪異黃酮等。但是,黃芪甲苷含量是最能評(píng)價(jià)處黃芪質(zhì)量的。根據(jù)藥理研究,黃芪具有增強(qiáng)免疫力,強(qiáng)心降壓,抗疲勞等作用??梢愿纳菩姆喂δ?,對(duì)腎上腺增生有一定抑制。根據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),黃芪的產(chǎn)地有很多,以甘肅隴西的為優(yōu)。



檢測(cè)黃芪中的黃芪甲苷含量,一般用到高效液相色譜(HPLC)法。


HPLC檢測(cè)黃芪甲苷,重點(diǎn)就在色譜的條件。能不能檢測(cè)出來,檢測(cè)的準(zhǔn)確度多少,就是看你怎么調(diào)試設(shè)備參數(shù),檢測(cè)出最清晰、最完整的色譜峰面積。當(dāng)然,前期的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備,也是很重要的。如果前期的準(zhǔn)備沒做好,很可能會(huì)沒提取出來,或與實(shí)際的含量有偏差。



色譜條件可以按照相關(guān)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),也可以通過適應(yīng)性試驗(yàn),最優(yōu)化設(shè)計(jì),確定出最佳的檢測(cè)條件。比如采用C18的色譜柱,乙腈-水為流動(dòng)相,蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等,還有進(jìn)樣量、進(jìn)樣速率、柱溫等。


標(biāo)準(zhǔn)品是必要的,它是測(cè)定黃芪甲苷含量的基礎(chǔ)。取黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品,精密稱量,加入甲醇后制成0.5mg/ml的溶液。對(duì)于樣品來說,是要好好處理了。樣品要在索氏提取器中進(jìn)行提取,先加入甲醇溶液,冷浸過夜,再加甲醇加熱回流4個(gè)小時(shí),提取液回收,溶劑濃縮,殘?jiān)铀?0ml,微熱使溶解,用水飽和的正丁醇振搖提取4次,每次40ml,合并正丁醇液,用氨試液充分洗滌2次,每次40ml,棄去氨液,正丁醇液蒸干,殘?jiān)铀?ml使溶解,放冷,通過D101型大孔吸附樹脂柱,以水50ml洗脫,棄去水液,再用40%乙醇30ml洗脫,棄去洗脫液,繼用70%乙醇80ml洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘?jiān)蛹状既芙?,轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。這個(gè)過程看起來是繁瑣的,這都是總結(jié)出來、驗(yàn)證出來的操作方法,在實(shí)際過程中需要熟悉完整的流程,并對(duì)關(guān)鍵細(xì)節(jié)有足夠的掌握,咨詢做過的人,可以獲得相對(duì)有效的建議。



分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液各20μl,注入液相色譜儀,測(cè)定,用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算,即得。


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