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酵母細(xì)胞壁多糖檢測(cè)方法
來(lái)源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-07-05 | 162 次瀏覽 | 分享到:

酵母細(xì)胞多糖是指從酵母細(xì)胞壁中提取出來(lái)的一些大分子糖類聚合物,主要成分包括葡聚糖、甘露聚糖等。其中,葡聚糖是靠近細(xì)胞膜的,位于細(xì)胞壁的內(nèi)層。它是由葡萄糖分子以β(1-3)鍵為主鏈相連,并結(jié)合β(1-6)鍵分支的大分子聚合物,一般稱為β葡聚糖。而甘露聚糖存在于細(xì)胞壁的外層,是由多個(gè)α-甘露糖分子以α(1-6)鍵為主鏈形成的,主鏈上結(jié)合了以α(1-2)和α(1-3)鍵數(shù)目不等的甘露糖側(cè)鏈。在葡聚糖和甘露聚糖之間是蛋白質(zhì),要能檢測(cè)出其中的具體的分子結(jié)構(gòu),是相對(duì)不容易的事情。



那么,酵母多糖到底有什么用呢?它在細(xì)胞壁的表面,能夠起到免疫的作用。在葡聚糖的刺激下,機(jī)體會(huì)產(chǎn)生大量的巨噬細(xì)胞,能夠吞噬那些損傷的、衰老的、死亡的細(xì)胞,甚至還能把侵入到體內(nèi)的病原微生物給吃掉。甘露聚糖有什么用呢,它是由2-10個(gè)單糖組成的,它能夠?qū)Σ≡⑸镞M(jìn)行識(shí)別,并粘附和排除,調(diào)控動(dòng)物消化道中的微生態(tài)結(jié)構(gòu)。因此,研究酵母細(xì)胞壁多糖,還是非常要醫(yī)學(xué)價(jià)值的。



由于酵母葡聚糖是不溶性多糖,并且和蛋白質(zhì)雜合在一起,檢測(cè)難度是有的。目前來(lái)說(shuō),檢測(cè)的方法有酶解法和高效液相色譜法。其中,酶解法就是在堿性條件下將酵母葡聚糖溶解,接著在酸性條件下將葡聚糖水解成單糖,用葡聚糖酶解成單個(gè)的葡萄糖。最后,檢測(cè)葡萄糖的含量。高效液相色譜法是將細(xì)胞壁多糖進(jìn)行水解,在色譜柱和流動(dòng)相的作用下,分離出葡聚糖和甘露聚糖。在水解的過(guò)程中,由于結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,可能存在水解不徹底的情況。它的結(jié)構(gòu)相互勾連,可能有的水解出來(lái)的,有的還是幾個(gè)粘合在一起。


對(duì)多糖的分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)和功能研究,是為了能夠提取出來(lái)并應(yīng)用在科研領(lǐng)域。液相檢測(cè)的步驟包括試劑制備、樣品準(zhǔn)備、檢測(cè)條件調(diào)試、標(biāo)準(zhǔn)曲線制作、樣品檢測(cè)和計(jì)算結(jié)果。記錄色譜峰的保留時(shí)間和峰面積,用標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰的保留時(shí)間定性,用標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰的峰面積來(lái)定量。


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