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羧酸酯酶主要位于肝、其他組織及細(xì)胞胞液、線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。它是一種多聚蛋白,主要催化酯、硫酸酯和酰胺的水解。參與外源性化合物,如農(nóng)藥殘留等的代謝過程,通過水解的作用將這些有毒害的物質(zhì)轉(zhuǎn)化為更容易排出體外的代謝產(chǎn)物。在脂質(zhì)代謝過程中,羧酸酯酶能夠水解甘油三酯,磷脂等,生成脂肪酸和甘油,為細(xì)胞提供足夠的能量。在藥物代謝過程中,羧酸酯酶能夠提高藥物在組織中的轉(zhuǎn)運效率。它還參與了生物體內(nèi)的一些信號分子的代謝和調(diào)節(jié),比如調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)神經(jīng)信號的傳遞和突觸功能。羧酸酯酶的作用和肝臟的功能有直接的關(guān)系,它維持了生理穩(wěn)態(tài)和健康。
檢測樣品中羧酸酯酶活力的方法,一般生化法,或酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法。
生化法:羧酸酯酶催化乙酸-1-萘酯生成萘酚,進一步與固藍顯色劑反應(yīng)生成有色物質(zhì),通過檢測該有色物質(zhì)在450 nm處的光吸收增加速率,進而得出羧酸酯酶(CarE)活性大小。
酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法:雙抗體夾心法測定標(biāo)本中的羧酸酯酶活性。通過純化的抗體包被微孔板,加入待測樣本,再與標(biāo)記的抗體結(jié)合,通過顯色反應(yīng)450 nm處測定吸光度,從而計算酶活性。
以上的兩種方法都是要采用標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法,如果有必要的話,每個測定還需要2-3個重復(fù),求取平均值,從而獲得相對有效,準(zhǔn)確的結(jié)果?,F(xiàn)在,科研實驗方面,都有相對比較成熟的試劑盒。省去了繁瑣的試劑配制和存儲的條件,但對操作過程和注意事項卻是有要求的??雌饋砗唵瘟?,其實更要認(rèn)真的對待。