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白頭翁皂苷含量檢測方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2025-04-17 | 34 次瀏覽 | 分享到:
植物白頭翁是一種傳統(tǒng)的中藥材,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,性寒,具有清熱解毒的作用。白頭翁皂苷主要包括B4和A3兩種,主要來源于毛茛科植物白頭翁。在藥理應(yīng)用方面,主要有抗菌抗炎,神經(jīng)保護,增強免疫力等。白頭翁皂苷 A3的化學(xué)式為C41H66O12,分子量為750.956,可溶于甲醇,乙腈,乙醇等溶劑,不溶于石油醚。白頭翁皂苷B4來源于干燥的根,它的化學(xué)式為C59H96O26,分子量為1221.38,可溶于甲醇,乙醇,DMSO等有機溶劑。

植物白頭翁是一種傳統(tǒng)的中藥材,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,性寒,具有清熱解毒的作用。白頭翁皂苷主要包括B4和A3兩種,主要來源于毛茛科植物白頭翁。在藥理應(yīng)用方面,主要有抗菌抗炎,神經(jīng)保護,增強免疫力等。白頭翁皂苷 A3的化學(xué)式為C41H66O12,分子量為750.956,可溶于甲醇,乙腈,乙醇等溶劑,不溶于石油醚。白頭翁皂苷B4來源于干燥的根,它的化學(xué)式為C59H96O26,分子量為1221.38,可溶于甲醇,乙醇,DMSO等有機溶劑。


科研方面,檢測白頭翁皂苷含量,一般采用高效液相色譜(HPLC)或液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)等。以HPLC為例,簡單的介紹一下檢測流程。


1.樣品處理


一般采用有機溶劑提取法,如粉碎過篩后,加入適量的甲醇,超聲處理,讓皂苷充分的溶解出來。然后,冷卻,過濾,得到含有機溶劑的皂苷。根據(jù)相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)或操作步驟,可以獲得相對詳細的操作步驟和參數(shù)。在有相關(guān)設(shè)備,溶劑,技術(shù)的前體下,無死角地完成操作。有的時候,需要對粗提液進一步的純化,比如用大孔樹脂等。



2.色譜條件


舉例,采用C18的色譜柱,長250mm,內(nèi)徑4.6um,粒徑5um;柱溫30-40℃。流動相為乙腈-0.1%磷酸溶液(29:71) ,也有甲醇和水(80:20)的流動相,流速為0.8-1.0ml/min,進樣量10-20uL。檢測器的話,有用到紫外檢測器,二極管陣列檢測器,質(zhì)譜檢測器等。質(zhì)譜檢測器,是在流動相分離提取的基礎(chǔ)上,實現(xiàn)對化合物的離子碎片化,確認(rèn)化合物的分子量和化學(xué)結(jié)構(gòu),能夠更準(zhǔn)確的計算出含量。


3.標(biāo)準(zhǔn)曲線


精密稱量白頭翁皂苷B4或A3對照品,加入甲醇,制成0.1mg/mL的溶液。成倍的,梯度稀釋6個濃度點,確保在檢測器的有效范圍內(nèi)。進樣,測定色譜峰,對面積進行積分,對應(yīng)各個標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程。


4.含量計算


和標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的色譜條件,進樣到HPLC,測出色譜峰,根據(jù)保留時間確定目標(biāo)化合物。對色譜峰面積進行積分,結(jié)合回歸方程,可以計算出樣品中的白頭翁皂苷含量。


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