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花生四烯酸（AA）是一種ω-6多不飽和脂肪酸，是花生油中飽和的花生酸的相對物?；瘜W(xué)式為C20H32O2，分子量304.5，結(jié)構(gòu)式CH3(CH2)4(CH=CHCH2)4，全順式-5,8,11,14-二十碳四烯酸。紫外線吸收峰為257nm，268nm，315nm。

花生四烯酸是細胞的重要組成，它以磷脂的形式存在機體各個組織的細胞膜磷脂上，決定了細胞膜的生物活性。在哺乳動物體內(nèi)，花生四烯酸只能通過亞油酸代謝而獲得，而亞油酸又不能自我合成，只能通過外在的膳食攝取，并通過代謝途徑合成?；ㄉ南┧岬姆肿雍兴膫€不飽和雙鍵，在空氣中暴露的時候，很容易就會被氧化降解。

檢測樣品中花生四烯酸含量，方法還是比較靈活的。常見的有氣相色譜（GC）法、氣質(zhì)聯(lián)用（GC-MS）法、高效液相色譜（HPLC）法、酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法等。

1.HPLC

HPLC是常用的方法，它適用于多種物質(zhì)的檢測，比如氨基酸、維生素、脂肪酸等，能夠較為準確的、精準的測定出花生四烯酸的含量。LC-MS和GC-MS則是更為靈敏的測定方法，它適合于脂肪酸代謝物、植物激素等物質(zhì)的精準檢測，通過分子量和結(jié)構(gòu)形式定性測定，并計算出樣品中化合物的含量。

2.GC

使用GC檢測花生四烯酸，需要先將樣品加入到乙醇中，離心后取上清液，用氮吹到干燥，再加入直鏈飽和混合脂肪酸。將經(jīng)過前處理的樣品注入氣相色譜儀中進行檢測，檢測條件是必備的。如果不知道檢測條件，就是兩眼一抹黑，什么都做不了?？梢詤⒖枷嚓P(guān)的檢測標準，也可以通過最優(yōu)化設(shè)計實驗方案來確定。舉例來說，柱子采用DB-WAX，柱長30m，內(nèi)徑0.25um，膜厚0.25um；進口溫度為250℃，柱溫70℃，溫度升高速率4℃/min，保溫10min，F(xiàn)ID檢測器，檢測溫度250℃。進樣量為1uL，氫氣速率30mL/min，空氣流速300mL/min，氮氣場強20mL/min進行測定。根據(jù)測定的峰值，計算出樣品中的花生四烯酸含量。

3.ELISA

這里用的是試劑盒的方法，具體步驟可以參考說明書。以小鼠花生四烯酸檢測為例，往預(yù)先包被AA捕獲抗體的微孔中依次加入樣本溶液、標準品、HRP標記的檢測抗體。經(jīng)過溫浴和洗滌，用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)變?yōu)樗{色，并在酸的作用下顯示未黃色。顏色的深淺和AA的含量是有正相關(guān)的線性關(guān)系的。用酶標儀，在450nm波長處，測吸光度值。根據(jù)標準品的吸光度值，繪制標準曲線；根據(jù)樣品的吸光度值，計算出樣品中的AA含量。