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酸棗仁皂苷主要來源于鼠李科植物酸棗的種子和果實(shí),酸棗仁是一味中藥材,皂苷是其中的主要活性物質(zhì)成分,具有抗氧化等作用,被廣泛的應(yīng)用在不同領(lǐng)域中。對(duì)酸棗仁皂苷的提取,是需要采用溶劑萃取的。通過有機(jī)溶劑比如乙醇、乙酸乙酯等,使得皂苷從樣品中分離出來,在進(jìn)行過濾、濃縮、減壓蒸餾等方式,得到相對(duì)純化的酸棗仁皂苷物質(zhì)。酸棗仁皂苷屬于四環(huán)三萜類皂苷,其中包括酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B、酸棗仁皂苷E等十幾種。
使用分光光度法可以測定樣品中酸棗仁總皂苷的含量,也可以使用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)法測定具體單個(gè)皂苷的含量。對(duì)照品選擇的是人參皂苷Rb1,用甲醇配置成1g/L溶液,備用。選擇6個(gè)不同體積的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,加入香草醛和硫酸,水浴加熱15min,冷卻后在最佳的檢測波長處,檢測對(duì)應(yīng)的吸光度。以吸光度為橫坐標(biāo),以濃度為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程及相關(guān)系數(shù)。取酸棗仁供試品的溶液,在最佳的波長處檢測吸光度,可以多做幾次重復(fù),求取平均值。測定的吸收峰值,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程,可以獲得樣品的酸棗仁皂苷rb1濃度,根據(jù)酸棗仁rb1占總皂苷的比例,計(jì)算出樣品中總皂苷的含量。
高效液相色譜法檢測酸棗仁皂苷A,采用C18的色譜柱,以乙腈和水為流動(dòng)相,梯度洗脫,使用蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論板數(shù)按酸棗仁皂苷A峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。以酸棗仁皂苷A為標(biāo)準(zhǔn)品,精密稱量,并以甲醇定容,制成0.1g/L的溶液。對(duì)于供試品,先粉碎,后過篩,在索氏提取器中,加入石油醚,加熱回流4h,除掉石油醚和殘?jiān)旁阱F形瓶中,加入乙醇溶液,加熱回流2h,過濾。殘?jiān)靡掖既芙?,并轉(zhuǎn)移到5mL容量瓶中定容。分別吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液5uL,10uL,樣品溶液10uL,注入高效液相色譜中測定,外標(biāo)兩點(diǎn)法測定計(jì)算。具體可以參考中國藥典。