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生長(zhǎng)素是最早被發(fā)現(xiàn)的植物激素，它是一類含有不飽和芳香族環(huán)和一個(gè)乙酸側(cè)鏈的內(nèi)源性激素。其英文簡(jiǎn)稱為IAA，化學(xué)本質(zhì)是吲哚乙酸。在生長(zhǎng)素中，最重要的化學(xué)物質(zhì)就是3-吲哚乙酸。生長(zhǎng)素是調(diào)節(jié)莖的生長(zhǎng)速率，抑制側(cè)芽，促進(jìn)根系不斷生根。就是，它能夠讓根向下扎，讓莖不斷升高。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中，可以用它來插枝生根。

植物吲哚乙酸難溶于水，易溶于乙醇、乙醚等有機(jī)溶劑。有光線的情況下，很容易被氧化成玫瑰紅色，生理活性也會(huì)降低。這里說一下，植物體內(nèi)游離的吲哚乙酸含量是比較低的，一般是呈酯的或肽的復(fù)合物。在生長(zhǎng)旺盛的植物組織，或花粉中含量較多。生長(zhǎng)素在植物的頂端分生組織中合成，被運(yùn)輸?shù)街参锏母鱾€(gè)部位，從形態(tài)學(xué)上端向下端運(yùn)輸。植物的生長(zhǎng)并不是靠單一激素的控制，而是多個(gè)激素共同起作用，達(dá)到一種平衡狀態(tài)。比如，當(dāng)生長(zhǎng)素不斷增加的時(shí)候，也在引導(dǎo)乙烯的形成。當(dāng)生長(zhǎng)素超過適當(dāng)?shù)臐舛?，就?huì)產(chǎn)生抑制生長(zhǎng)的現(xiàn)象。要不然，很多植物會(huì)長(zhǎng)成怪物了，不能適應(yīng)自然規(guī)律的變化，就會(huì)影響到它們自身的生存。

檢測(cè)植物組織中的生長(zhǎng)素IAA含量，其主要方法有高效液相色譜（HPLC）法、氣相色譜（GC）法、酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法等。這里簡(jiǎn)單的介紹一下，如果需要詳細(xì)的步驟，或測(cè)定含量的話，需要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟去完成，避免出現(xiàn)遺漏的現(xiàn)象。對(duì)于方法的介紹，這是根據(jù)科研的需求。方法不同，設(shè)備也有差異的，但結(jié)果還是相接近的。

1.高效液相色譜（HPLC）法

在使用HPLC檢測(cè)生長(zhǎng)素IAA的過程中，采用常規(guī)的C18反相色譜柱，流動(dòng)相為甲醇和水，進(jìn)樣量為20ul，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，外標(biāo)法測(cè)定。設(shè)定適當(dāng)?shù)牧魉佟⑻荻认疵摃r(shí)間和柱溫。通過軟件記錄測(cè)定的色譜峰面積，標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作是采用6個(gè)梯度濃度進(jìn)行測(cè)定，并根據(jù)不同濃度的IAA和峰值之間的關(guān)系，制作出標(biāo)準(zhǔn)曲線來。對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚恚热缣崛〉?，在相同的條件下上機(jī)檢測(cè)。將檢測(cè)出來的IAA峰值，結(jié)合上面的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出樣品中的IAA含量。這里，還要考慮回收率的問題。

2.氣相色譜（GC）法

這種方法沒有HPLC常見，但也是可以檢測(cè)IAA含量的。通過對(duì)植物樣品進(jìn)行提取，凈化，衍生等處理。將IAA和其他化合物分離，通過GC檢測(cè)器測(cè)定其含量。氣相色譜檢測(cè)，要控制過程中的多種參數(shù)，比如柱溫，升溫速率，色譜柱，檢測(cè)器等。對(duì)于設(shè)備的操作，可以參考相關(guān)的說明書。而方法的操作，要依據(jù)相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)或規(guī)程，按部就班完成實(shí)驗(yàn)。

3.酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法

檢測(cè)原理：將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品，和未知濃度的樣品，加入到酶標(biāo)微孔板內(nèi)。先將待測(cè)物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫浴，拿出來洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再進(jìn)行溫浴和洗滌步驟，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入A、B兩種試劑，和酶結(jié)合物同時(shí)作用，產(chǎn)生顏色。這個(gè)顏色的深淺，是和物質(zhì)的濃度成線性關(guān)系的。通過梯度稀釋，可以測(cè)定吸光度值，并制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。對(duì)樣品檢測(cè)的數(shù)據(jù)，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以計(jì)算出樣品中的生長(zhǎng)素IAA含量。操作步驟參考說明書，看清楚實(shí)驗(yàn)要求和注意事項(xiàng)。