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昆蟲神經(jīng)酰胺含量檢測(cè)方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-07-16 | 171 次瀏覽 | 分享到:

神經(jīng)酰胺是由長鏈脂肪酸和鞘氨醇的氨基經(jīng)脫水而形成的一類酰胺化合物,它是細(xì)胞之間基質(zhì)的主要部分,保持角質(zhì)層的平衡,維持皮膚水性。神經(jīng)酰胺存在于所有的真核細(xì)胞中,對(duì)細(xì)胞的分化、增值、衰老、凋亡等生命活動(dòng)有重要的調(diào)節(jié)作用。神經(jīng)酰胺具有皮膚抗老化作用,讓肌膚光潤有彈性,減少皺紋的產(chǎn)生。當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞開始衰老的時(shí)候,神經(jīng)酰胺就促使細(xì)胞分化更新,讓新的角質(zhì)層出現(xiàn),從而保持堅(jiān)挺有利的年輕狀態(tài)。神經(jīng)酰胺則參與細(xì)胞的分化,角質(zhì)層中40%~50%的皮脂由神經(jīng)酰胺構(gòu)成。另外,神經(jīng)酰胺還促進(jìn)細(xì)胞新陳代謝,傳到細(xì)胞信息。



神經(jīng)酰胺在昆蟲的生理生化過程中發(fā)揮著多種重要作用,包括調(diào)節(jié)鞘脂質(zhì)代謝、促進(jìn)發(fā)育進(jìn)程、研究存活和繁殖能力等。神經(jīng)酰胺可以調(diào)節(jié)昆蟲感知器的表達(dá)和活動(dòng),當(dāng)外界有風(fēng)吹草動(dòng)的時(shí)候,昆蟲的觸角就能感知到變化,從而傳遞信號(hào),并調(diào)節(jié)行為活動(dòng)。



檢測(cè)昆蟲神經(jīng)酰胺的方法有比較多,比如高效液相色譜法(HPLC-ELSD),液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)法,質(zhì)譜(MS)法等。


1.高效液相色譜(HPLC-ELSD)法


通過加熱的方法,將流動(dòng)相蒸發(fā),檢測(cè)樣品顆粒的光散射。ELSD是一種通用型的質(zhì)量檢測(cè)器,其響應(yīng)值和待測(cè)物質(zhì)的質(zhì)量有關(guān),能夠?qū)崿F(xiàn)定量檢測(cè)。這種方法不需要衍生化,操作簡單,分析時(shí)間短,誤差小。由于這種方法是通過光散射進(jìn)行的,響應(yīng)值和待測(cè)物質(zhì)的質(zhì)量關(guān)系比較復(fù)雜,需要選擇適合的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。



2.液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)法


這種方法是聯(lián)合了高效液相色譜的分離功能和質(zhì)譜的檢測(cè)分析能力,樣品在經(jīng)過液相的分離作用后,就進(jìn)入了質(zhì)譜檢測(cè)器中。經(jīng)過離子源的離子化作用后,在質(zhì)量分析器中將離子碎片按荷質(zhì)比分開,在記錄軟件中獲得質(zhì)譜圖。這種方法比單獨(dú)的HPLC更靈敏,檢測(cè)速度更高,準(zhǔn)確性更好,選擇性更強(qiáng)。目前,這是檢測(cè)神經(jīng)遞質(zhì)常用的方法。但是,檢測(cè)的話,需要由專業(yè)的技術(shù)和設(shè)備完成,價(jià)格也是稍微有點(diǎn)高的。


3.質(zhì)譜(MS)法


剛剛不是說了LC-MS法,這里單獨(dú)說MS法有什么區(qū)別嗎?充分利用質(zhì)譜的高靈敏度和高分辨率,來分析昆蟲樣品中的神經(jīng)酰胺含量。首先,就是將樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶崛『蛢艋幚?。因?yàn)橐M(jìn)質(zhì)譜檢測(cè)器,采用電噴霧離子化,如果雜質(zhì)太多,容易產(chǎn)生一些干擾因素。使用這種離子源將神經(jīng)酰胺轉(zhuǎn)化為氣態(tài)離子,在質(zhì)譜儀中檢測(cè)這些離子的質(zhì)量和豐度,依據(jù)特征物質(zhì)的質(zhì)量數(shù),分析神經(jīng)酰胺的含量。


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